In Splatoon zijn de zusters niet speelbaar, in plaats daarvan geven ze informatie over de multiplayermaps die in de roulatie zitten, evenementen of ander nieuws. Bij gebruik van de amiibo kunnen spelers luisteren naar nieuwe nummers van de soundtrack terwijl Callie of Marie een unieke dans vertoont. De amiibo worden zowel los als in een bundel beschikbaar gesteld.
Naast de nieuwe amiibo worden de eerder verschenen amiibo van Inkling Boy, Inking Girl en Inkling Squid opnieuw uitgegeven. De figuurtjes hebben een andere kleur gekregen, maar behouden dezelfde functionaliteit.
De nieuwe Splatoon-amiibo zijn vanaf 8 juli beschikbaar.